(哈藥集團生物(wù)疫苗有(yǒu)限公(gōng)司，黑龍江哈爾濱，150030)

摘　要：豬傳染性胃腸炎由冠狀病毒引起，患病仔豬以嘔吐、腹瀉、脫水為(wèi)特征。目前抗病毒和抗毒素等常規藥物(wù)對本病的治療作(zuò)用(yòng)不明顯，對這種病的預防和控制以接種疫苗為(wèi)主，因此本文(wén)對豬傳染性胃腸炎疫苗的研究給以闡述，為(wèi)有(yǒu)效地預防該疾病提供思路。并指出了研究中(zhōng)存在的問題以及未來展望為(wèi)有(yǒu)效地預防該疾病提供思路。

關鍵詞：豬傳染性胃腸炎疫苗；應用(yòng)

Research and Application to Vaccine of Transmissible Gastroenteritis of pigs

（Harbin Pharmaceutical Group Bio-vaccine Co, Ltd，Harbin150030, China）

Abstract：Ansmissible Gastroenteritis of Pigs is caused by coronavirus. The symptom of Sicken piglets is vomiting, diarrhea and dehydration. Therapeutic effect of Antiviral and antitoxin is not obvious to ansmissible Gastroenteritis of Pigs.  Vaccination is  the main way of prevention and control to the ill. So this article gives an expound to the research of vaccine of ansmissible Gastroenteritis of Pigs, that can provide some ideas to prevent this ill. This article also points out the issues in the research and provide some ideas to prevent this ill effectively in the future.

Keywords：Transmissible gastroenteritis of pigs vaccine；Application

豬傳染性胃腸炎(Transmissible gastroenteritis of pigs，TGE)由冠狀病毒引起，患病仔豬以嘔吐、腹瀉、脫水為(wèi)主要特征[1]。TGE在我國(guó)廣泛流行，冬春季節常發，是豬的常見多(duō)發病。豬傳染性胃腸炎具(jù)有(yǒu)發病突然、傳播迅速、流行面廣，它可(kě)使各年齡豬發病，而且仔豬場一旦發病其死亡率可(kě)達100%。TGE常與其他(tā)疾病并發或繼發，是引起規模化養豬場仔豬腹瀉性死亡的主要原因之一。接種疫苗是預防和控制豬傳染性胃腸炎主要方法，目前抗生素和中(zhōng)西藥等常規藥物(wù)對本病的治療作(zuò)用(yòng)不明顯，主要是采用(yòng)疫苗的預防。本文(wén)就目前臨床上應用(yòng)的以及正在研究的豬傳染性胃腸炎疫苗給以綜合論述。

1　豬傳染性胃腸炎疫苗的應用(yòng)

1.1 人工(gōng)感染強毒

就是強毒感染免疫的辦(bàn)法，主要用(yòng)于妊娠母豬免疫使新(xīn)生仔豬獲得被動保護，但由于病毒毒力過強，有(yǒu)使母豬流産(chǎn)和散毒的危險，目前國(guó)内外已經廢止此種方法。

1.2 滅活疫苗

哈爾濱獸醫(yī)研究所賈華強[2]用(yòng)TB株培育的強毒制備TGE滅活細胞苗，制備疫苗用(yòng)2種佐劑，即油包水乳化苗和氫氧化鋁吸附苗。通過現地實驗證明，TGE滅活細胞苗是安(ān)全的、反應輕微的疫苗。在一些試驗中(zhōng)乳化苗的免疫原性明顯高于吸附苗。豬場用(yòng)滅活細胞苗免疫母豬所産(chǎn)仔豬在離乳時的死亡率平均是8.5%低于美國(guó)、加拿(ná)大、荷蘭等國(guó)哺乳期仔豬死亡率。在産(chǎn)仔日檢測被免疫母豬初乳特異的病毒中(zhōng)和抗體(tǐ)水平實驗室評價免疫性的可(kě)靠方法。但其免疫應答(dá)産(chǎn)生較慢，不能(néng)激發産(chǎn)生以SIgA抗體(tǐ)為(wèi)主的黏膜免疫反應，且制苗成本昂貴。

1. 3 弱毒疫苗　

    目前毒株主要有(yǒu)美國(guó)的TGE-Vac株、匈牙利的CKP株和日本的TO-163 株等。目前國(guó)産(chǎn)疫苗是由中(zhōng)國(guó)農業科(kē)學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所研發。應用(yòng)國(guó)内分(fēn)離的華毒株，采用(yòng)二甲基亞礬處理(lǐ)細胞的方法，使病毒在胎豬腎細胞上培養并連續傳代165次緻弱，其間又(yòu)經5次克隆純化篩選獲得。具(jù)有(yǒu)性能(néng)穩定、免疫原性好及适用(yòng)各種年齡、品種、性别豬隻的特點。總保護率可(kě)達90%以上。該疫苗主要應用(yòng)于妊娠母豬，母豬在産(chǎn)前一個半月肌肉注射弱毒疫苗lmL，産(chǎn)前半個月再滴鼻(或後海穴位注射)1mL，可(kě)使新(xīn)生仔豬在吮吸母乳後獲得免疫保護。該疫苗還可(kě)以用(yòng)于主動免疫，新(xīn)生仔豬口服0.5mL弱毒疫苗後7-14d後就可(kě)産(chǎn)生有(yǒu)效的免疫保護。但弱毒疫苗會出現免疫失敗，其主要原因是所産(chǎn)生的分(fēn)泌性免疫球蛋白(SIgA)水平達不到自然感染TGEV時所産(chǎn)生的水平，并且可(kě)能(néng)出現毒力返強等不安(ān)全現象[3]。

1.4 聯苗

目前在豬病臨床上多(duō)采用(yòng)聯苗進行豬傳染性胃腸炎等病毒性腹瀉病的預防。周仲芳等研制的PED和TGE弱毒二聯疫苗，免疫母豬所産(chǎn)仔豬通過哺乳獲得了相當高的血清抗體(tǐ)，在出生後第7 d時接近母體(tǐ)的中(zhōng)和抗體(tǐ)水平抗體(tǐ)下降緩慢，在免疫後第5月，免疫豬血清中(zhōng)仍能(néng)檢測出抗體(tǐ)。在誘導妊娠母豬和小(xiǎo)豬産(chǎn)生抗體(tǐ)以及母豬産(chǎn)後向哺乳仔豬傳遞抗體(tǐ)方面未見有(yǒu)相互影響的現象[4]。由于弱毒疫苗産(chǎn)生免疫力快，更适用(yòng)于做緊急預防接種。但是目前，弱毒苗最令人關切的是穩定性問題。終有(yǒu)恩等[5]用(yòng)TGE及PED克隆化弱毒株以l:l配比制成TeE、PED二聯弱毒疫苗，經克隆純化後都保持了良好的穩定性。

    哈藥疫苗公(gōng)司出品的豬傳染性胃腸炎(TGE)和豬流行性腹瀉(PED)二聯滅活苗，滅活疫苗在免疫後l4d産(chǎn)生免疫力，使用(yòng)效果好，安(ān)全穩定，毒力不返強；接種後能(néng)迅速的産(chǎn)生高水平而又(yòu)持久的免疫保護力；可(kě)用(yòng)于3日齡以上的仔豬免疫也可(kě)用(yòng)于成豬及妊娠母豬接種；免疫途徑獨特，經後海穴注射激發良好粘膜免疫；溶解迅速，易于操作(zuò)，豬場實驗證明對不同年齡的豬隻主動免疫保護率為(wèi)96% ，妊娠母豬的被動免疫保護率為(wèi)87%。

鄒勇等人[6]采用(yòng)豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和輪狀病毒細胞培養物(wù)制備了三聯滅活疫苗。實驗室免疫結果表明，育肥豬和妊娠母豬免疫後15d達到較高的免疫水平，免疫有(yǒu)效期超過6個月，母豬産(chǎn)前30d進行三聯苗免疫後，可(kě)使母豬分(fēn)娩當天的抗體(tǐ)維持在較高的水平，這就為(wèi)新(xīn)生豬提供了較高抗體(tǐ)水平的初奶。為(wèi)初生豬被動免疫打下了基礎。分(fēn)娩後30 d，母豬血清抗體(tǐ)仍然維持在較高的水平。

目前在防治豬傳染性胃腸炎上，使用(yòng)複合疫苗非常普遍[7]。在美國(guó)已有(yǒu)多(duō)達具(jù)有(yǒu)12種抗原的複合疫苗得到注冊。PED和TGE為(wèi)兩種均由冠狀病毒所緻的腸道病毒病，在實際工(gōng)作(zuò)中(zhōng)很(hěn)難确診，而且污染豬場混合感染的程度相當高。複合疫苗的研制和使用(yòng)為(wèi)這兩種疾病的防制提供一種有(yǒu)效、方便的解決方法。

1.5 基因工(gōng)程疫苗

轉基因植物(wù)疫苗是把植物(wù)基因工(gōng)程技(jì )術與機體(tǐ)免疫機理(lǐ)相結合，生産(chǎn)出能(néng)使機體(tǐ)獲得特異抗病能(néng)力的疫苗。轉基因植物(wù)疫苗口服誘導粘膜免疫，生産(chǎn)簡便、成本低廉，不需要冷藏和低溫運輸但目前隻能(néng)限于實驗室研究。核酸疫苗是基因疫苗研究的熱點，目前，研究較多(duō)的是DNA疫苗，它由編碼能(néng)引起保護性免疫反應的病原體(tǐ)抗原基因片段和載體(tǐ)構建而成。核酸疫苗克服了減毒活疫苗的可(kě)能(néng)返祖并導緻人類和動物(wù)疾病，以及病毒發生變異而對新(xīn)型的變異株不起作(zuò)用(yòng)的缺點，不過目前在臨床上由于其價格與多(duō)聯苗相比還不能(néng)被大面積應用(yòng)，尤其是針對豬傳染性胃腸炎這種冠狀病毒病。重組活載體(tǐ)疫苗重組活載體(tǐ)疫苗是用(yòng)基因工(gōng)程技(jì )術将病毒或細菌構建成一個載體(tǐ)，把外源基因插入其中(zhōng)使之表達的活疫苗。重組活載體(tǐ)疫苗誘導産(chǎn)生的免疫比較廣泛，它具(jù)有(yǒu)活疫苗的免疫效力高、成本低及滅活疫苗的安(ān)全性好等優點，目前處于研究階段。

結合目前現在臨床應用(yòng)仍使用(yòng)豬傳染性胃腸炎和流行性腹瀉二聯苗多(duō)見，由此可(kě)見，我們的基因疫苗還需要大量的實驗與實踐，降低其成本更好地為(wèi)養殖業服務(wù)。

2 疫苗的使用(yòng)

     ⑴不同工(gōng)藝的疫苗保存方法是不同的，疫苗的保存一定要嚴格的按照使用(yòng)說明說上的方法進行保存，否者疫苗會失效。如豬流行性腹瀉與豬傳染性胃腸炎二聯油乳劑滅活疫苗需要在2℃-8℃保存，保存期一般為(wèi)1年；豬傳染性胃腸炎弱毒疫苗需要-20℃條件下保存，保存期一般為(wèi)3年 。   

⑵使用(yòng)疫苗時要注意免疫接種的方法，如疫苗的接種方法不當，有(yǒu)時會造成嚴重的後果。豬傳染性胃腸炎疫苗采用(yòng)豬後海穴接種，效果較好。免疫動物(wù)的初乳及免疫仔豬血清中(zhōng)IL-2含量最高，在一定程度上反映了機體(tǐ)免疫功能(néng)的提高，說明後海穴對機體(tǐ)免疫機能(néng)有(yǒu)正向促進作(zuò)用(yòng)[8]。
       ⑶被免疫豬必須健康無病，發現發熱、發绀、食欲不振、呼吸困難、腹瀉、過度瘦弱和剛去勢的豬隻不應接種疫苗。正在潛伏期的豬隻接種弱毒活疫苗後，可(kě)能(néng)會激發疫情，甚至引起豬隻發病死亡。妊娠母豬盡可(kě)能(néng)不要接種弱毒活疫苗避免經胎盤傳播，造成仔豬帶毒。

⑷避免使用(yòng)免疫抑制劑，在免疫前後5~7天都要避免使用(yòng)影響疫苗免疫應答(dá)的藥物(wù)和免疫抑制劑，如氟苯尼考、磺胺類藥、氨基糖苷類等，因為(wèi)對抗體(tǐ)的合成有(yǒu)一定抑制作(zuò)用(yòng)，或對T、B淋巴細胞轉化有(yǒu)明顯的抑制作(zuò)用(yòng)，從而影響免疫效果[9]。     
       ⑸接種疫苗後：豬隻精(jīng)神不振，減食，體(tǐ)溫稍高，卧地嗜睡等。一般不需治療，1～2天後可(kě)自行恢複；豬隻表現呼吸加快、喘氣、眼結膜潮紅、發抖、口吐白沫、後肢不穩、倒地抽搐等，可(kě)立即肌注0.1%鹽酸腎上腺等。

3 小(xiǎo)結 

一般認為(wèi)，TGE的免疫為(wèi)腸道免疫，即隻有(yǒu)初乳中(zhōng)的IgA能(néng)在腸道中(zhōng)殺死病毒，抵抗感染。乳汁中(zhōng)高效價的IgG抗體(tǐ)也可(kě)能(néng)中(zhōng)和病毒，但由于母乳中(zhōng)IgG的效價下降很(hěn)快，真正較長(cháng)時間内起作(zuò)用(yòng)的還是IgA。盡管TGE血清抗體(tǐ)的檢測并不能(néng)真正反映保護水平，但至少反映出機體(tǐ)通過感染或免疫産(chǎn)生了免疫反應，血清中(zhōng)和抗體(tǐ)的水平從一定程度上反映出機體(tǐ)接受抗原刺激的劑量、方式或重複性。在開發TGEV疫苗時，如何捉高疫苗刺激母豬腸道IgA的應答(dá)能(néng)力，同時又(yòu)做到疫苗毒株已經完全緻弱或無感染力，以确保初生仔豬不發病。這是擺在疫苗研究人員面前的一大難題。大量研究結果表明，仔豬主要通過初乳獲得母源SIgA，産(chǎn)生對冠狀病毒性腹瀉的被動免疫保護，血清中(zhōng)的循環抗體(tǐ)IgG不能(néng)提供保護，經非腸道免疫不能(néng)産(chǎn)生母源免疫[10]。因此，黏膜免疫是使仔豬獲得免疫保護的重要途徑。所以，探索安(ān)全、有(yǒu)效、廉價、可(kě)以誘導黏膜免疫的新(xīn)型疫苗，是今後的研究方向。

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