新(xīn)城疫、禽流感(H9亞型)二聯滅活疫苗臨床應用(yòng)效果實驗

郭照成龐亮孫心叢秋實王建琪 韓春嬌王風亮郭昌友李叔偉☆

(哈藥集團生物(wù)疫苗有(yǒu)限公(gōng)司，黑龍江哈爾濱，150030)

Newcastle Disease and Avian Influenza (H9 Subtype) Inactivated Vaccineclinical application effect of the experiment

GUO Zhaocheng, PANG Liang, SUN Xin, CHONG Qiu-shi, WANG Jian-qi, HAN Chun-jiao, WANG Feng-liang, GUO Chang-you, LI Shu-wei☆

（Harbin Pharmaceutical Group Bio-vaccine Co.,Ltd，Harbin150030，China）

Abstract:This experiment by detecting antibody titer of Newcastle disease,avian flu (H9 subtype) duplex inactivated vaccine of different manufacturer in different inoculation days of age and vaccination dose toevaluate the effect ofthe inactivated vaccine. Results show that chicks in 7-days-oldwere vaccinatedthe inactivated vaccine that produced antibodies is higher than antibodies of 1-day-old vaccination, and the more the dose of vaccination the more antibodies. Through the experiment found the optimalimmune days of ageandimmune doseto provide clinical basis for the prevention of Newcastle disease and H9avian influenza.

Keywords:Newcastle disease, H9avian influenza,HI

摘要：本實驗通過對不同廠家的新(xīn)城疫、禽流感(H9亞型)二聯滅活疫苗在不同接種日齡和不同接種劑量産(chǎn)生抗體(tǐ)效價值的情況，來評價新(xīn)流二聯滅活疫苗對雞群預防新(xīn)城疫和H9流感疫病的效果。結果表明雛雞在7日齡接種新(xīn)流二聯滅活疫苗所産(chǎn)生的新(xīn)城疫和H9抗體(tǐ)值高于1日齡接種所産(chǎn)生的抗體(tǐ)值，且接種的劑量越大所産(chǎn)生的抗體(tǐ)值越高。通過本實驗找到最适合雞群免疫此疫苗的免疫日齡和免疫劑量，為(wèi)我們預防新(xīn)城疫和H9流感疫病提供臨床效果的依據。

關鍵詞：新(xīn)城疫、H9亞型流感、HI

雞新(xīn)城疫是禽類主要病毒性傳染病之一，對養雞業的危害極大[1]。近年來，ND在我們有(yǒu)普遍蔓延的趨勢，目前許多(duō)雞場仍将采用(yòng)接種疫苗的方式來預防該病。對于新(xīn)城疫疫苗，我國(guó)主要是引進國(guó)外的一些弱毒株，如V4株、La Sota株和B1株等[2]，來預防雞ND。近年來，H9N2亞型禽流感流行日益頻繁，病毒也進入一個快速進化階段，許多(duō)雞場的雞接種疫苗後保護效果較差，2002年後H9N2亞型禽流感在商(shāng)品肉雞上發病日益嚴重，造成較高死亡率[3]。而從2007年後，由于H9亞型分(fēn)支發生改變，H9引起的臨床症狀也發生改變，國(guó)内開始采取最近地方分(fēn)離出來的H9毒株來預防此類疾病。

近些年我國(guó)雞ND和H9混合感染的幾率在逐年上升，目前使用(yòng)新(xīn)流二聯疫苗預防這兩種疾病效果很(hěn)好，但是很(hěn)多(duō)地區(qū)在使用(yòng)此類疫苗時，免疫方法和接種劑量都有(yǒu)所不同，本實驗通過對蛋雛雞接種新(xīn)流二聯疫苗，在不同首免日齡和不同免疫劑量進行抗體(tǐ)檢測，以此找出最佳的免疫時間和免疫劑量，為(wèi)預防ND和H9疫病提供理(lǐ)論依據。

1材料與方法

1.1試驗動物(wù)

 1日齡商(shāng)品蛋雛雞5500隻，黑龍江省哈爾濱市某養殖場。

1.2試驗用(yòng)藥

哈藥疫苗：黃瓶新(xīn)流二聯滅活疫苗20150507、視界新(xīn)流二聯滅活疫苗20150310、國(guó)内某廠家新(xīn)流二聯滅活疫苗，國(guó)外某廠家新(xīn)流二聯滅活疫苗、ND和H9标準抗原及陽性血清購(gòu)自中(zhōng)國(guó)獸醫(yī)藥品監察所。

1.3試驗設計

分(fēn)組情況：蛋雛雞雞每組500隻，詳見表1：

表1實驗分(fēn)組情況

A、B、C、D組1日齡按以上疫苗進行免疫，免疫前采血，進行新(xīn)城疫和H9抗體(tǐ)檢測。免疫後的7、14、21天每組随機抽取20隻雞采血，分(fēn)離血清，進行新(xīn)城疫和H9抗體(tǐ)檢測，并計算平均值。

E、F、G、H、IJ、K組7日齡按以上疫苗進行免疫，免疫前采血，進行新(xīn)城疫和H9抗體(tǐ)檢測。免疫後的7、14、21天采血，分(fēn)離血清，進行新(xīn)城疫和H9抗體(tǐ)檢測，并計算平均值。

2結果與分(fēn)析

表2 不同廠家0日齡相同免疫劑量ND抗體(tǐ)效價（log2）

相同劑量，在1日齡免疫不同疫苗，在14日齡開始産(chǎn)生新(xīn)城疫抗體(tǐ)值，在21日齡時，A、C組免疫效果要好于D組，A組免疫效果最好。

表3 不同疫苗、不同日齡、相同的免疫劑量ND抗體(tǐ)效價（log2）

1日齡首免和7日齡首免新(xīn)流油苗，從結果看7日齡首免，在免疫後21天産(chǎn)生的新(xīn)城疫抗體(tǐ)值要高于1日齡首免。E組新(xīn)城疫抗體(tǐ)值要高于F組。

表4 相同的日齡，不同免疫劑量ND抗體(tǐ)效價（log2）

從結果看，在免疫同意疫苗14天産(chǎn)生新(xīn)城疫抗體(tǐ)值看，到免疫後21日齡I組相對較好，也就是說免疫劑量大的抗體(tǐ)值更好一些。但是免疫0.1和0.2ml劑量從疫苗開始産(chǎn)生抗體(tǐ)值看，也能(néng)夠對新(xīn)城疫病起保護作(zuò)用(yòng)。

表5 相同免疫劑量ND抗體(tǐ)效價（log2）

相同劑量不同疫苗在7日齡免疫後，免疫後的14—21日齡H,I組新(xīn)城疫抗體(tǐ)值要明顯好于K組，到免疫後的21日齡，I組效果更好。

表6 不同廠家，1日齡免疫相同劑量H9抗體(tǐ)效價（log2）

在1日齡免疫相同劑量的不通過疫苗，在疫苗免疫7天後，7日齡H9抗體(tǐ)值D組較高，B組次之，免疫後的14、21日齡,四個組H9抗體(tǐ)值都相對偏低，這可(kě)能(néng)與免疫日齡和免疫劑量有(yǒu)關。

表7不同疫苗、不同日齡、相同的免疫劑量H9抗體(tǐ)效價（log2）

1日齡首免和7日齡首免新(xīn)流油苗，從結果看7日齡首免，在免疫後21天産(chǎn)生的H9抗體(tǐ)值要高于1日齡首免。E組抗體(tǐ)值要高于F組。

表8相同的日齡，不同免疫劑量H9抗體(tǐ)效價（log2）

不同劑量相同疫苗在7日齡首免，從結果看免疫劑量最大的I組H9免疫效果最好，免疫劑量最小(xiǎo)的F組免疫效果相對不高。

表9相同免疫劑量H9抗體(tǐ)效價（log2）

相同劑量不同疫苗在7日齡首免後，在免疫後21日日齡看，H、I組H9免疫效果要高于K組；H組與I組相比較，I組免疫效果要好于H組。

3讨論

3.1對于蛋雛雞來說，目前免疫新(xīn)流二聯滅活疫苗的首免時間主要有(yǒu)兩個，一個是在1日齡進行首免，還有(yǒu)就是在7日齡左右進行首次免疫。通過1日齡首免和7日齡首免進行抗體(tǐ)效價的對比看，7日齡首免的抗體(tǐ)值要高一些，這與母源抗體(tǐ)有(yǒu)關系。目前雛雞ND和H9流感的母源抗體(tǐ)值相對很(hěn)高，本實驗ND的母源抗體(tǐ)值在6log2以上，H9的抗體(tǐ)值在8log2以上，在這種情況下，母源抗體(tǐ)能(néng)維持雛雞21日齡，此時抗體(tǐ)值能(néng)為(wèi)此4log2左右，對雞群是有(yǒu)保護力的，那麽在這種情況下，7日齡首免新(xīn)流二聯滅活疫苗所産(chǎn)生的抗體(tǐ)值就會受母源抗體(tǐ)的幹擾小(xiǎo)，在抗體(tǐ)效價和保護持續時間上都要比1日齡首免效果好一些。

3.2目前很(hěn)多(duō)地區(qū)對于油苗的接種劑量也存在不同的看法，本實驗選取哈藥生物(wù)疫苗一款高端新(xīn)流二聯滅活疫苗分(fēn)三個劑量0.1ml、0.2ml、0.3ml分(fēn)别對雞群進行接種，檢測免疫後産(chǎn)生的抗體(tǐ)水平高低，首免日齡是7日齡。從結果看接種劑量最大的所産(chǎn)生的抗體(tǐ)值也是最高的，接種劑量與抗體(tǐ)值成正比關系。接種劑量0.1ml所産(chǎn)生的抗體(tǐ)值對雞群也有(yǒu)保護力，那麽具(jù)體(tǐ)接種劑量根據實際情況定，如在ND和H9感染壓力大的地區(qū)，接種劑量就要用(yòng)0.3ml，感染壓力相對輕微的地區(qū)接種劑量可(kě)以是0.1ml或者是0.2ml。在秋冬季節時接種疫苗也要使用(yòng)最大劑量。

3.3目前我國(guó)使用(yòng)新(xīn)流二聯滅活疫苗預防ND和H9的發生，各生物(wù)疫苗廠家新(xīn)流二聯疫苗在抗體(tǐ)效價方面略有(yǒu)差别，從實驗結果看不同廠家新(xīn)流二聯疫苗接種後所産(chǎn)生的ND和H9抗體(tǐ)值有(yǒu)差别，但是差異不顯著，這主要是與生産(chǎn)工(gōng)藝有(yǒu)關系。新(xīn)流二聯滅活疫苗當中(zhōng)的H9毒株各廠家都不想同，目前我們所使用(yòng)的H9毒株大部分(fēn)都是地方分(fēn)析毒株，而國(guó)家标準毒株使用(yòng)較少。我國(guó)H9亞型AIV在2007年之前，是以第h9.4.2.1、第h9.4.2.2分(fēn)支、第h9.4.2.3分(fēn)支和第h9.4.2.4分(fēn)支為(wèi)主的，2007年之後，我國(guó)H9亞型AIV以第h9.4.2.5分(fēn)支為(wèi)主，而且随着毒株流行的不同，H9疫病的臨床表現也不相同。所以說我們在使用(yòng)新(xīn)流二聯疫苗時，所選用(yòng)的H9毒株要盡可(kě)能(néng)使用(yòng)H9亞型AIV以第h9.4.2.5分(fēn)支上的。

參考文(wén)獻

[1]蔡寶祥,殷震,謝(xiè)三星等.動物(wù)傳染病診斷學(xué)[M].(南京:江蘇科(kē)學(xué)技(jì )術出版社), 1993.177～180.

[2]嚴維巍,王永坤,田慧芳等.一株雞副粘病毒的分(fēn)子特性研究[J].揚州大學(xué)學(xué)報(自然科(kē)學(xué)版), 2000.3(1):27～31.

H9N2

[3]劉東,宮曉,劉曉東.亞型禽流感流行分(fēn)析及疫苗毒株的篩選[J].中(zhōng)國(guó)動物(wù)檢疫, 2013.6:45～47.