[前言]痢菌淨學(xué)名(míng)乙酰甲喹，是我國(guó)研制的具(jù)有(yǒu)自主知識産(chǎn)權的獸用(yòng)抗菌藥品,能(néng)抑制菌體(tǐ)的脫氧核糖核酸合成.本品抗菌譜廣，對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌均有(yǒu)較強的抑菌作(zuò)用(yòng).不易産(chǎn)生抗藥性，價格低廉，在畜牧養殖業上應用(yòng)廣泛。但在使用(yòng)過程中(zhōng)常因超劑量應用(yòng)導緻中(zhōng)毒現象發生，造成不應有(yǒu)的損失。到目前為(wèi)止，痢菌淨損傷機體(tǐ)軟組織的機理(lǐ)尚未闡明。自由基醫(yī)學(xué)的發展為(wèi)此方面的研究提供了新(xīn)思路。本實驗通過複制不同水平的雞痢菌淨中(zhōng)毒模型，檢測機體(tǐ)的SOD、MDA、T-AOC，以期從痢菌淨影響機體(tǐ)自由基代謝(xiè)和抗氧化系統功能(néng)角度闡述痢菌淨的中(zhōng)毒機理(lǐ)。

1材料與方法

1.1實驗動物(wù)分(fēn)組與處理(lǐ)

選用(yòng)40日齡健康雄性海蘭蛋雞，嚴格按常規飼養标準飼養。将實驗雞随機分(fēn)成3組，每組15羽。飼喂相同全價飼料。第Ⅰ組：正常對照組，飼喂正常的飼料拌料；第Ⅱ組：低劑量組，飼喂拌有(yǒu)400mg/kg的痢菌淨飼料，3次/d;第Ⅲ組:高劑量組,飼喂拌有(yǒu)600mg/kg的痢菌淨飼料,3次/d.飼喂3天.

1.2樣本的采集和檢測項目與方法

觀察臨床表現及剖檢變化。飼養至第3天時先心髒采血,析出血清.再采取胸腺、脾、法氏囊免疫組織備用(yòng)。檢測項目方法：血清、胸腺、脾、法氏囊SOD、MDA、T-AOC、勻漿蛋白含量，分(fēn)光光度計法。

1.3主要試劑與儀器

   主要試劑：SOD測定試劑盒，MDA測定試劑盒，T-AOC測定試劑盒，由南京建成生物(wù)工(gōng)程所提供。主要儀器：731型分(fēn)光光度計，

2實驗結果

2.1臨床表現及剖檢變化

臨床表現：高劑兩組和低劑量組雞表現精(jīng)神沉郁，羽毛松亂，采食和飲水減少或廢絕，頭部皮膚呈暗紫色，排淡黃、灰白水樣稀糞。2日齡時部分(fēn)雞出現癱瘓，兩翅下垂，逐漸發展成頭頸部後仰，彎曲，角弓反張、抽搐倒地而死。

剖檢變化：死亡後的雛雞脫水，肌肉呈暗紫色，腺胃腫脹，乳頭暗紅出血，肌胃皮質(zhì)層脫落出血、潰瘍。肝髒腫大，呈暗紅色，質(zhì)脆易碎。腎髒出血，心髒松弛，心内膜及心肌有(yǒu)散在性出血點。腸道黏膜彌漫性充血，腸腔空虛，小(xiǎo)腸前部有(yǒu)黏稠淡灰色稀薄内空物(wù)，洩殖腔嚴重充血。

2.2SOD的檢測結果

由表1可(kě)知：各痢菌淨中(zhōng)毒組血清、胸腺、脾、法氏囊SOD均在不同程度地高于對照組。

                           表1SOD的檢測結果             單位：（μ/ml）                               

   注：同一列數值角碼字母相同者，表示兩組間差異不顯著。不同者，表示兩組間差異顯著，其中(zhōng)大寫字母表示差異極顯著(p<0.01)，小(xiǎo)寫字母表示差異顯著（p<0.05）

2.3 MDA的檢測結果

由表2可(kě)知：各痢菌淨中(zhōng)毒組血清、胸腺、脾、法氏囊MDA均在不同程度地高于對照組，但在脾的低劑量組中(zhōng)與對照組無顯著差異。

表2MDA的檢測結果             單位：（nmol/ml）

2.4 T-AOC的檢測結果

由表3可(kě)知：各痢菌淨中(zhōng)毒組血清、胸腺、脾、法氏囊T-AOC均在不同程度地高于對照組，在胸腺中(zhōng)毒組中(zhōng)第Ⅱ組與第Ⅰ組有(yǒu)顯著差異(P<0.05)，第Ⅲ組與第Ⅰ組差異極顯著(P<0.01)。

                            表3 T-AOC的檢測結果          單位：（μ/ml）     

3讨論

  超氧化物(wù)歧化酶（SOD）對機體(tǐ)的氧化與抗氧化平衡起着極其重要的作(zuò)用(yòng)，此酶能(néng)特異性地催化超氧陰離子自由基的歧化反應。在正常生理(lǐ)條件蔔，機體(tǐ)内自由基不斷生成，又(yòu)不斷被清除，生成與清除維持相對的動态平衡，因而從整體(tǐ)上看顯示不出自山(shān)基對機體(tǐ)的氧化損傷或生理(lǐ)破壞作(zuò)用(yòng)。但是在殺菌藥物(wù)中(zhōng)毒下，譬如痢菌淨中(zhōng)毒，當機體(tǐ)内存在過量的藥物(wù)時，藥物(wù)中(zhōng)的有(yǒu)害物(wù)質(zhì)可(kě)迅速轉化為(wèi)活性極強的自山(shān)基，使體(tǐ)内自山(shān)基增多(duō)。過多(duō)的自山(shān)基超出機體(tǐ)的清除能(néng)力，破壞了體(tǐ)内自由基産(chǎn)生與清除之間和動态平衡，從而發生山(shān)過多(duō)自由基引起的一系列對機體(tǐ)有(yǒu)害的生理(lǐ)、病理(lǐ)改變。其中(zhōng)，脂質(zhì)的作(zuò)用(yòng)，主要是與質(zhì)膜中(zhōng)的多(duō)不飽和脂肪酸反應，造成脂質(zhì)過氧化，其分(fēn)解産(chǎn)物(wù)MDA可(kě)造成DNA分(fēn)子鏈斷裂或堿基缺失，除形成緻突變或緻癌的病理(lǐ)學(xué)基礎外，也可(kě)自行破壞各種生物(wù)膜結構的完整性，從而給機體(tǐ)細胞帶來嚴重的損害。胸腺和脾髒作(zuò)為(wèi)機體(tǐ)的主要免疫器官，在免疫系統功能(néng)的正常發揮起着十分(fēn)重要的作(zuò)用(yòng)，當任何因素使胸腺和脾髒受到損害時都會使細胞免疫和體(tǐ)液免疫的功能(néng)受到影響。而細胞免疫和體(tǐ)液免疫在全身防禦、清除廢物(wù)以及防治腫瘤癌症的發生中(zhōng)起着至關重要的作(zuò)用(yòng)。

T- AOC是近幾年研究發現的用(yòng)于衡量機體(tǐ)抗氧化系統功能(néng)狀況的綜合性指标。T- AOC的大小(xiǎo)可(kě)代表和反映機體(tǐ)抗氧化酶系統和非酶系統對外來刺激的代償能(néng)力以及機體(tǐ)自由基代謝(xiè)的狀态，其中(zhōng)的酶系統主要包括谷胱甘肽過氧化物(wù)酶(GSH- Px)、超氧化物(wù)歧化酶( SOD)、過氧化氫酶( CAT)等，非酶系統主要包括還原型谷胱甘肽( GSH) .VE .VC .VK .VA等維生素類、尿酸、血漿銅藍蛋自(CP) .胡蘿蔔素、葡萄糖等，由于T-AOC具(jù)有(yǒu)很(hěn)強的代表性，所以是機體(tǐ)反映機體(tǐ)抗氧化功能(néng)的一個良好指标。

痢菌淨中(zhōng)毒時機體(tǐ)抗氧化能(néng)力降低，必然造成自由基和脂質(zhì)過氧化物(wù)的蓄積，對機體(tǐ)造成一系列的損傷。如，破壞核酸和染色質(zhì):損害蛋白質(zhì)和酶，脂質(zhì)過氧化自山(shān)基從蛋白質(zhì)分(fēn)子中(zhōng)奪取氫原子，形成蛋白質(zhì)自由基，進一步引起蛋白質(zhì)聚合肽鏈斷裂，亦可(kě)使蛋白質(zhì)與脂質(zhì)結合形成聚合物(wù)，緻蛋白質(zhì)變性、酶活性喪失:破壞脂類代謝(xiè)，自由基反應可(kě)引發脂質(zhì)過氧化的鏈式自由基反應:損傷生物(wù)膜，自由基和活性氧首先攻擊生物(wù)膜的不飽和脂肪酸，使膜的流動性下降，膜蛋白聚合使生物(wù)膜的完整性遭到破壞。嚴重者，溶酶體(tǐ)膜破壞，溶酶體(tǐ)釋放，細胞溶解破壞死亡；誘導多(duō)種疾病的發生:迄今發現，氧中(zhōng)毒、炎症、免疫失調、衰老、中(zhōng)毒病、心血、管系統疾病、肺病、肝病、胃腸道疾病、泌尿系統疾病、肌肉萎縮等均與自由基代謝(xiè)異常有(yǒu)關。

本實驗結果表明，中(zhōng)毒後在胸腺、脾、法氏囊内的SOD值減少，MDA值增加，T-AOC值減少，表明在胸腺、脾、法氏囊内清除MDA的能(néng)力減弱，痢菌淨在胸腺、脾、法氏囊内通過某些反應産(chǎn)生了自由基，影響了自由基的代謝(xiè)，從而使自由基增多(duō)。機體(tǐ)免疫組織内，含有(yǒu)大量的自由基，生物(wù)膜被大量的自由基破壞，使免疫組織喪失了免疫功能(néng)，無法産(chǎn)生可(kě)以清除自由基的SOD，引起免疫失調。自由基使機體(tǐ)更容易老化，各個組織功能(néng)減弱。