中(zhōng)國(guó)動物(wù)疫病預防控制中(zhōng)心 

關于印發《養殖場非洲豬瘟病毒弱毒株 防控技(jì )術指南》的通知

 各省、自治區(qū)、直轄市及計劃單列市動物(wù)疫病預防控制機構，新(xīn)疆生産(chǎn)建設兵團畜牧獸醫(yī)工(gōng)作(zuò)總站：

 為(wèi)做好非洲豬瘟防控工(gōng)作(zuò)，指導養殖場及時發現非洲豬瘟弱毒株，提升防控能(néng)力，按照農業農村部畜牧獸醫(yī)局工(gōng)作(zuò)安(ān)排，我中(zhōng)心聯合非洲豬瘟專業實驗室、非洲豬瘟區(qū)域實驗室(廣州)編寫了《養殖場非洲豬瘟病毒弱毒株防控技(jì )術指南》，現印發你單位，供各地參考。

                                                                      中(zhōng)國(guó)動物(wù)疫病預防控制中(zhōng)心

                                                                       2023年11月6日

附件：

養殖場非洲豬瘟病毒弱毒株防控技(jì )術指南

 當前，我國(guó)非洲豬瘟出現弱毒株感染情況，生豬感染弱毒株後，水平傳播能(néng)力強、潛伏期長(cháng)、帶毒排毒水平低，持續時間長(cháng)且無規律，臨床呈現隐蔽性強、早期監測難，對母豬群體(tǐ)生産(chǎn)性能(néng)影響較大等特點。為(wèi)指導養殖場及時發現非洲豬瘟病毒弱毒株，提升防控能(néng)力，制定本技(jì )術指南。

 一、提升臨床發現能(néng)力

 非洲豬瘟病毒弱毒株感染臨床症狀不典型，個體(tǐ)差異大。妊娠母豬表現反複發燒、厭食等症狀，部分(fēn)母豬流産(chǎn)、高比例死胎、乳房結痂，初生仔豬活力差。育肥群體(tǐ)非應激條件下，症狀不明顯，應激情況下表現皮膚壞死斑、關節和脾髒腫大、壞死等症狀。要強化技(jì )術培訓，提高對弱毒株識别能(néng)力。養殖場人員應每日開展豬場場内巡欄，觀察豬群臨床情況，一旦發現豬隻出現可(kě)疑症狀時，要第一時間采樣檢測。有(yǒu)條件的養殖場可(kě)使用(yòng)紅外體(tǐ)溫監測系統每天對所有(yǒu)豬隻進行體(tǐ)溫監測，發現異常的，要及時采樣檢測。發現陽性和疑似病例要及時向當地農業農村(畜牧獸醫(yī))部門報告，并按要求規範處置。

 二、優化監測方案

 要配合使用(yòng)非洲豬瘟病毒核酸和抗體(tǐ)檢測，優化監測方案，确保監測效果。定期開展場外環境檢測，每周對場内門把手、風機、料槽等高風險點進行病毒核酸檢測。定期抽樣監測母豬群及育肥群的病毒抗體(tǐ)情況，高風險期要考慮對母豬全群進行病毒抗體(tǐ)監測。母豬分(fēn)娩後，采集臍帶血、胎衣或胎衣液等樣品以及母豬深咽部拭子聯合尾根血混樣，進行病毒核酸檢測。臨床發現異常豬隻，要立即逐頭對母豬群進行病毒核酸和抗體(tǐ)檢測;對育肥群開展棉繩口腔液采樣，進行病毒核酸檢測。對于病死豬，在确保養殖場内生物(wù)安(ān)全的情況下，采集淋巴結、肺髒等樣品及時檢測病毒核酸。此外，豬群進行常規疫苗接種、轉群、去勢等生産(chǎn)操作(zuò)後，要抽樣檢測非洲豬瘟病毒核酸。要避免過高頻次的全群普查，降低交叉污染或擴散風險。

 三、科(kē)學(xué)采樣檢測

 采用(yòng)深咽拭子聯合尾根血混樣，或口鼻拭子聯合腹股溝淋巴結穿刺混樣的采樣方法，可(kě)提高病原檢出率。對臨床異常豬，要同時采集前腔靜脈血、尾靜脈血或耳緣靜脈血，進行病毒抗體(tǐ)檢測。采樣要使用(yòng)聚丙烯材質(zhì)拭子，避免使用(yòng)頭部為(wèi)棉花(huā)制品的拭子、含海藻酸鈣拭子以及木(mù)柄拭子，防止棉花(huā)纖維對蛋白質(zhì)吸附影響病毒洗脫效果及抑制PCR反應的物(wù)質(zhì)影響檢測結果。前腔靜脈采血時，要保證每一頭豬一個保定繩，保定繩用(yòng)後放入含有(yǒu)消毒水的桶中(zhōng)消毒，避免交叉污染。

 樣品保存應使用(yòng)無菌、對核酸無吸附作(zuò)用(yòng)的螺旋蓋塑料管。每個樣品管應再套一個樣品袋防止樣品洩露和污染。新(xīn)采集的臨床樣品應在2～8℃下保存，采集後2～4小(xiǎo)時内送至實驗室。用(yòng)于核酸檢測的樣品應當盡快進行檢測，能(néng)在24小(xiǎo)時内檢測的樣品可(kě)置于4℃保存;24小(xiǎo)時内無法檢測的樣品應置于-70℃或以下保存(如無-70℃保存條件，則于-20℃冰箱暫存)。

 病原檢測方法：可(kě)采用(yòng)非洲豬瘟病毒(P72/CD2v/MGF)、非洲豬瘟病毒(P72/EGFP/mCherry)、非洲豬瘟病毒(P72/X64R/MGF360-14L)等三重熒光PCR方法檢測病毒核酸。必要時，需要對部分(fēn)病毒基因進行序列測定，如EP402R基因。對非常見基因變異且臨床症狀特殊病例，需進行全基因組測序鑒别。抗體(tǐ)檢測方法：采用(yòng)經批準的間接ELISA、阻斷ELISA等方法或膠體(tǐ)金試紙條。

 四、确保檢測質(zhì)量

 要強化檢測人員技(jì )術能(néng)力，定期開展培訓和考核。要定期檢測PCR儀、熒光定量PCR儀等設備運行能(néng)力，及時維護保養。要定期參加實驗室間能(néng)力比對，日常使用(yòng)标準物(wù)質(zhì)或标準樣品進行檢測質(zhì)控。要規範實驗操作(zuò)，避免病毒污染。對樣品接收及處理(lǐ)間、試劑準備間、核酸提取和擴增間等區(qū)域以及門把手、傳遞窗、試驗台等高風險位置應定期采樣檢測。實驗結束後，立即清潔工(gōng)作(zuò)區(qū)，使用(yòng)消毒液對桌面、地面、生物(wù)安(ān)全櫃等進行消毒，對操作(zuò)間進行紫外線(xiàn)照射消毒，妥善儲存開封試劑和耗材。

 五、強化生物(wù)安(ān)全防護措施

 落實好常态化防控措施可(kě)有(yǒu)效阻止非洲豬瘟病毒感染。針對弱毒株流行特點，要持續從人、車(chē)、物(wù)、豬等方面強化防控措施。

 (一)人員管理(lǐ)   人員在進場前3天不得去養豬場、屠宰廠(場)、無害化處理(lǐ)廠、動物(wù)及動物(wù)産(chǎn)品交易市場等生物(wù)安(ān)全高風險場所。根據不同區(qū)域生物(wù)安(ān)全等級進行人員管理(lǐ)，人員遵循從生物(wù)安(ān)全風險低的區(qū)域向生物(wù)安(ān)全風向高的區(qū)域流動。

 進入辦(bàn)公(gōng)/生活區(qū)域人員   要更換消毒過的衣服及鞋靴，洗手消毒并有(yǒu)效淋浴後，方可(kě)進場，淋浴時要尤其注意指甲清洗。實踐表明，一次有(yǒu)效淋浴(使用(yòng)沐浴露和洗發水，且淋浴5分(fēn)鍾以上)可(kě)以消除人員體(tǐ)表攜帶的病毒;随身物(wù)品經消毒後入場，嚴禁攜帶豬肉制品入場;未經允許，禁止進入生産(chǎn)區(qū)，進入生産(chǎn)區(qū)前，人員要在生産(chǎn)區(qū)淋浴間洗澡，所攜帶物(wù)品須經生産(chǎn)區(qū)物(wù)資消毒間消毒後，方可(kě)帶入。

 進入豬舍的流程   人員按規定路線(xiàn)進入各自工(gōng)作(zuò)區(qū)域，禁止進入未被授權的工(gōng)作(zuò)區(qū)域。每棟豬舍入口處都應放置消毒盆(桶)、洗手消毒盆。進出豬舍要洗手，清洗、消毒工(gōng)作(zuò)靴(先刷洗鞋底鞋面污物(wù)，然後在腳踏消毒盆浸泡消毒)。人員離開生産(chǎn)區(qū)時，要将工(gōng)作(zuò)服放置在含有(yǒu)消毒劑的桶中(zhōng)浸泡消毒，且同樣需要按要求洗澡，防止把病毒帶出。嚴禁飼養人員串豬舍。

 (二)車(chē)輛管理(lǐ)   外來車(chē)輛或者去過高風險場所的本場車(chē)輛，未經徹底清洗消毒進入養殖場，是病毒傳入的重要途徑。車(chē)輛要經過徹底清洗、消毒和烘幹後使用(yòng)(流程包括：高壓沖洗，确保無表面污物(wù);清潔劑處理(lǐ)有(yǒu)機物(wù);消毒劑噴灑消毒;充分(fēn)烘幹)。要盡量選擇場外作(zuò)業，減少車(chē)輛入場。

 外來運豬車(chē)管理(lǐ)   外來運豬車(chē)，必須選擇在農業農村(畜牧獸醫(yī))部門登記備案車(chē)輛，清洗、消毒及烘幹後，方可(kě)接近豬場出豬台或中(zhōng)轉站(台)。随後對車(chē)輛所經道路進行徹底消毒。

 飼料運送車(chē)管理(lǐ)   飼料運送車(chē)應停放在場區(qū)外安(ān)全距離，對車(chē)體(tǐ)和車(chē)輪進行消毒;卸下飼料後，由場内人員對飼料外包裝(zhuāng)表面消毒。建議設置中(zhōng)轉料塔、場内飼料運輸車(chē)，飼料從場外直接輸送到中(zhōng)轉料塔，運輸車(chē)輛不必進入豬場内。

 内部運豬車(chē)管理(lǐ)   選擇場内空間相對獨立的地點進行車(chē)輛洗消和停放。運豬車(chē)使用(yòng)完畢後要立即到指定地點清洗、消毒及烘幹。

 死豬/豬糞運輸車(chē)管理(lǐ)   死豬/豬糞運輸車(chē)專場專用(yòng)。轉運死豬/豬糞時，避免與外部車(chē)輛接觸，運輸至死豬或豬糞暫存點，暫存點距離場區(qū)要大于100-200米。轉運後，車(chē)輛及時清洗、消毒及幹燥，并消毒車(chē)輛所經道路。

 私家車(chē)管理(lǐ)   私家車(chē)禁止進入生産(chǎn)區(qū)和生活區(qū)，宜在距離場區(qū)外100米以上位置停放。

 (三)物(wù)資管理(lǐ)   獸藥疫苗、飼料等生産(chǎn)物(wù)資，以及食材等生活物(wù)資，是豬場重點管理(lǐ)的風險物(wù)資。豬場要制定物(wù)資進場計劃，盡可(kě)能(néng)減少入場頻次，并保證每批次進場物(wù)資的消毒效果。

 入場獸藥疫苗管理(lǐ)   嚴格執行進場消毒，疫苗及有(yǒu)溫度要求的藥品，拆掉外層包裝(zhuāng)，使用(yòng)消毒劑浸泡消毒後再轉入儲存或立即使用(yòng)。其他(tā)常規藥品，拆掉外層包裝(zhuāng)，經烘幹、或熏蒸消毒，轉入儲存或立即使用(yòng)。嚴格按照說明書或規程儲存、使用(yòng)疫苗及藥品，疫苗瓶和注射器等醫(yī)療廢棄物(wù)應及時進行無害化處理(lǐ)。豬舍内部使用(yòng)後的疫苗瓶等廢棄物(wù)，要在舍内使用(yòng)密閉袋密封，消毒劑浸泡消毒後帶出。

 飼料管理(lǐ)   禁止從疫區(qū)購(gòu)買玉米等飼料原料，确保飼料無病原污染。了解購(gòu)進的全價飼料是否含有(yǒu)動物(wù)源性飼料添加劑，避免飼料中(zhōng)添加動物(wù)源性飼料添加劑。飼料經充分(fēn)幹燥或加熱熟化後使用(yòng)，所有(yǒu)飼料包裝(zhuāng)袋均充分(fēn)熏蒸消毒。

 入場食材管理(lǐ)   在入場食材的選取上，要求食材生産(chǎn)、流通情況清晰、可(kě)控，無病原污染;禁止生鮮豬肉及制品入場;蔬菜和瓜果類食材無泥土、無爛葉，禽類和魚類食材無血水，經食品消毒處理(lǐ)後入場。進入生産(chǎn)區(qū)的飯菜，應由豬場廚房提供熟食，禁止生鮮食材進入;飯菜容器經消毒後進入。

 (四)豬群管理(lǐ)   要優化管理(lǐ)制度，在引種、轉運、出售等高風險生産(chǎn)環節中(zhōng)做好全程防控管理(lǐ)。

 避免場外散養或放養   避免場外散養和放養模式，防止家豬與野豬接觸及采食丢棄的垃圾食物(wù)。

 宜實施“全進全出”管理(lǐ)制度   “全進全出”模式是豬場飼養管理(lǐ)、減少疫病循環傳播的有(yǒu)效措施，養殖場戶應盡可(kě)能(néng)采取“全進全出”的飼養模式。

 引進豬隻管理(lǐ)   嚴格執行引種檢測、隔離，堅持自繁自養。引種前需經過非洲豬瘟等重大動物(wù)疫病檢測，抗原、抗體(tǐ)确認陰性，在場外或場内特定區(qū)域實施隔離觀察，确認安(ān)全後方可(kě)入場。對僅飼養育肥豬的豬場，全部空欄消毒後再購(gòu)入仔豬，要注意觀察入場後健康情況。

 豬隻轉運管理(lǐ)   豬隻轉運一般包括斷奶仔豬轉運、淘汰豬轉運、育肥豬出欄轉運以及後備豬轉運。根據是否自有(yǒu)和可(kě)控，将運輸車(chē)輛分(fēn)為(wèi)兩類：自有(yǒu)可(kě)控車(chē)輛可(kě)在豬場進行豬隻轉運。

 售豬管理(lǐ)   禁止銷售病死豬，禁止生豬販運、承運等外來人員，以及外來拉豬車(chē)輛進入養殖場。避免内外人員交叉。豬場趕豬人員嚴禁接觸出豬間(台)靠近場外生豬車(chē)輛的一側，外來人員禁止接觸出豬間(台)靠近場内一側。售豬前、後，要及時對出豬間(台)、停車(chē)處、趕豬通道和裝(zhuāng)豬區(qū)域進行全面清洗消毒。出豬間(台)及附近區(qū)域、趕豬通道應硬化，方便沖洗、消毒，做好防鼠、防雨水倒流。